• facebook
  • njikọ
  • youtube

Ihe mgbochi, nke a na-akpọkwa immunoglobulins (Ig), bụ glycoproteins na-ejikọta kpọmkwem na antigens.
 
A na-emepụta nkwadebe mgbochi mmadụ site na ịgba ọgwụ mgbochi ọrịa anụmanụ na ịnakọta ọgwụ mgbochi.Ya mere, antiserum na-enwekarị ọgwụ mgbochi megide antigens ndị ọzọ na-enweghị njikọ na protein ndị ọzọ dị na serum.Molecules antigen izugbe na-enwekarị ọtụtụ epitopes dị iche iche, yabụ ọgwụ mgbochi ọdịnala bụkwa ngwakọta nke mgbochi megide ọtụtụ epitopes dị iche iche.Ọbụlagodi ọgwụ mgbochi serum nke a na-eduzi megide otu epitope ka nwere ọgwụ mgbochi dị iche iche nke sel B cell dị iche iche na-emepụta.Ya mere, a na-akpọkwa ọgwụ mgbochi serum nkịtị polyclonal antibodies, ma ọ bụ polyclonal mgbochi maka mkpụmkpụ.
 
Monoclonal antibody (monoclonal antibody) bụ mgbochi edo edo nke ukwuu nke otu mkpụrụ ndụ B na-emepụta ma na-eduzi naanị megide otu epitope.A na-akwadokarị ya site na teknụzụ hybridoma — teknụzụ antibody hybridoma dabere na teknụzụ njikọta cell, na-ejikọta mkpụrụ ndụ B na ikike iji zoo ọgwụ mgbochi kpọmkwem na mkpụrụ ndụ myeloma nwere ikike uto na-enweghị ngwụcha n'ime hybridomas B-cell.Mkpụrụ ndụ hybridoma a nwere njirimara nke cell nne na nna.Ọ nwere ike gbasaa ruo mgbe ebighị ebi na anwụghị anwụ na vitro dị ka mkpụrụ ndụ myeloma, ọ pụkwara ịmepụta ma zoo ọgwụ nje dị ka lymphocytes splenic.Site na cloning, enwere ike nweta ahịrị monoclonal sitere na otu cell hybridoma, ya bụ, ahịrị cell hybridoma.Ọgwụ nje ndị ọ na-emepụta bụ ọgwụ mgbochi ọrịa nke ukwuu megidere otu ihe na-achọpụta antigenic, ya bụ, ọgwụ mgbochi monoclonal.
 
Ọgwụ mgbochi dị ka otu monomers ma ọ bụ karịa Y (ya bụ, ọgwụ mgbochi monoclonal ma ọ bụ mgbochi polyclonal).monomer nke ọ bụla nwere ụdị Y nwere ụdọ polypeptide anọ, gụnyere ụdọ abụọ dị arọ yiri ya na agbụ ọkụ abụọ yiri ya.A na-akpọ yinye ọkụ na agbụ dị arọ aha dịka ịdị arọ molekụla ha si dị.N'elu ihe owuwu nke Y bụ mpaghara na-agbanwe agbanwe, nke bụ saịtị njikọ antigen.(Ndepụta sitere na echiche Detai Bio-Monoclonal Antibody)
 
Ọdịdị mgbochi
1Yinye dị arọ
E nwere ụdị ụgbụ ígwè dị arọ ise nke anụ mammalian Ig, nke nwere mkpụrụedemede Grik α, δ, ε, γ, na μ.A na-akpọ ọgwụ mgbochi ndị kwekọrọ na IgA, IgD, IgE, IgG, na IgM.Agbụ dị arọ dị iche iche dị iche na nha na nhazi.α na γ nwere ihe ruru amino acid 450, ebe μ na ε nwere ihe ruru amino acid 550.
Agbụ dị arọ ọ bụla nwere mpaghara abụọ: mpaghara na-agbanwe agbanwe na mpaghara agbanwe agbanwe.Ihe mgbochi niile nke otu ụdị nwere otu mpaghara na-adịgide adịgide, mana enwere ọdịiche dị n'etiti ọgwụ mgbochi ụdị dị iche iche.Mpaghara na-adịgide adịgide nke agbụ dị arọ γ, α, na δ nwere ngalaba Ig atọ na tandem, yana mpaghara hinge iji mee ka mgbanwe ya dịkwuo elu;mpaghara mgbe niile nke agbụ dị arọ μ na ε mejupụtara ngalaba 4 Ig.Mpaghara na-agbanwe agbanwe nke agbụ dị arọ nke mgbochi ahụ nke mkpụrụ ndụ B dị iche iche na-emepụta dị iche, mana mpaghara mgbanwe nke mgbochi ahụ nke otu mkpụrụ ndụ B ma ọ bụ cell clone na-emepụta bụ otu, na mpaghara mgbanwe nke yinye dị arọ ọ bụla dị ihe dị ka 110 amino acid n'ogologo., Ma mepụta otu ngalaba Ig.
 
Yinye ọkụ
Enwere naanị ụdị ụdọ ọkụ abụọ na anụ mamma: ụdị lambda na ụdị kappa.Yinye ọkụ ọ bụla nwere ngalaba abụọ jikọtara: mpaghara na-agbanwe agbanwe na mpaghara na-agbanwe agbanwe.Ogologo yinye ọkụ dị ihe dịka 211 ~ 217 amino acids.Agbụ ọkụ abụọ dị na mgbochi ọ bụla na-adị otu mgbe.Maka anụ mamma, yinye ọkụ dị na mgbochi ọ bụla nwere naanị otu ụdị: kappa ma ọ bụ lambda.N'ụfọdụ vertebrates dị ala, dị ka azụ̀ cartilaginous (fish cartilage) na azụ ọkpụkpụ, a na-ahụkwa ụdị ụdọ ọkụ ndị ọzọ dị ka ụdị iota (iota).
 
Fab na Fc ngalaba
Enwere ike ijikọ akụkụ Fc ozugbo na enzymes ma ọ bụ akwa fluorescent iji kpọọ ọgwụ mgbochi.Ọ bụ akụkụ ebe mgbochi mgbochi na-agba na efere n'oge usoro ELISA, ọ bụkwa akụkụ ebe a na-amata ọgwụ mgbochi nke abụọ ma jikọta na immunoprecipitation, immunoblotting na immunohistochemistry.Enwere ike ịgbaji ọgwụ mgbochi n'ime akụkụ abụọ F (ab) na otu Fc site na enzymes proteolytic dị ka papain, ma ọ bụ enwere ike imebi ha site na mpaghara hinge site na pepsin na hydrolyzed n'ime otu F (ab) 2 ngalaba na otu Fc akụkụ.Iberibe mgbochi IgG na-aba uru mgbe ụfọdụ.N'ihi enweghị akụkụ Fc, akụkụ F (ab) agaghị agbanye na antigen, ọ gaghịkwa ejide ya site na mkpụrụ ndụ na-alụso ọrịa ọgụ na ọmụmụ vivo.N'ihi obere iberibe molekụla na enweghị ọrụ njikọ njikọ (n'ihi enweghị akụkụ Fc), a na-ejikarị akụkụ Fab mee ihe maka rediolabeling na ọmụmụ ihe na-arụ ọrụ, na akụkụ Fc na-ejikarị dị ka onye na-egbochi ihe na-eme ka ọ bụrụ ihe na-egbochi ihe na-eme ka ọ dị na histochemical.
 
Mpaghara na-agbanwe agbanwe na mgbe niile
Mpaghara na-agbanwe agbanwe (mpaghara V) dị na 1/5 ma ọ bụ 1/4 (nwere ihe dị ka 118 amino acid residues) nke agbụ H dị nso na N-terminus na 1/2 (nwere ihe dị ka 108-111 amino acid residues) n'akụkụ N-terminus nke agbụ L.Mpaghara V ọ bụla nwere mgbanaka peptide kpụrụ site na intra-chain disulfide bonds, na mgbanaka peptide ọ bụla nwere ihe dị ka 67 ruo 75 amino acid residues.Ngwakọta na nhazi nke amino acid dị na mpaghara V na-ekpebi ihe mgbochi mgbochi antigen.N'ihi ụdị amino asịd na-agbanwe agbanwe mgbe niile na mpaghara V, enwere ike ịmepụta ọtụtụ ụdị ọgwụ mgbochi nwere nkọwa antigen dị iche iche.A na-akpọ mpaghara V nke L yinye na H yinye VL na VH, n'otu n'otu.Na VL na VH, amino acid mejupụtara na usoro nke ụfọdụ mpaghara mpaghara nwere ogo dị elu nke mgbanwe.A na-akpọ mpaghara ndị a hypervariable mpaghara (HVR).Ngwakọta amino acid na nhazi nke akụkụ ndị na-abụghị HVR na mpaghara V bụ ihe na-adịghị agbanwe agbanwe, nke a na-akpọ mpaghara framework.Enwere mpaghara hypervariable atọ na VL, na-adịkarị na amino acid residues 24 ruo 34 na 89 ruo 97 n'otu n'otu.A na-akpọ HVR atọ nke VL na VH HVR1, HVR2 na HVR3, n'otu n'otu.Nnyocha na nyocha nke X-ray crystal diffraction gosipụtara na mpaghara hypervariable bụ n'ezie ebe antigen antigen na-ejikọta ya, ya mere a na-akpọ ya mpaghara mmeju-ekpebi (CDR).Enwere ike ịkpọ HVR1, HVR2 na HVR3 nke VL na VH CDR1, CDR2 na CDR3 n'otu n'otu.N'ozuzu, CDR3 nwere ogo dị elu nke hypervariability.Mpaghara hypervariable bụkwa ebe bụ isi ebe a na-achọpụta ihe nhụsianya nke molecules Ig dị.N'ọtụtụ ọnọdụ, agbụ H na-arụ ọrụ dị mkpa karịa ijikọ na antigen.
2Mpaghara na-adịgide adịgide (mpaghara C)dị na 3/4 ma ọ bụ 4/5 (ihe dị ka site na amino acid 119 ruo na ọdụ C) nke agbụ H dị nso na C terminus na 1/2 (nwere ihe dị ka 105 amino acid residues) n'akụkụ C njedebe nke L yinye.Mpaghara ọ bụla na-arụ ọrụ nke yinye H nwere ihe dị ka ihe fọdụrụ amino acid 110, ma nwee mgbanaka peptide nke mejupụtara 50-60 amino acid fọdụrụnụ jikọtara ya na njikọ disulfide.Ngwakọta amino acid na nhazi nke mpaghara a na-adịgide adịgide n'otu anụmanụ Ig isotype L na otu ụdị H.Otu ahụ, ọ nwere ike jikọta kpọmkwem na antigen kwekọrọ, mana nhazi nke mpaghara C ya bụ otu, ya bụ, ọ nwere otu antigenicity.Enwere ike ijikọ ịnyịnya mgbochi mmadụ IgG nke abụọ (ma ọ bụ mgbochi mgbochi) yana ngwakọta abụọ nke ọgwụ nje (IgG) megide exotoxins dị iche iche na-eme.Nke a bụ ihe ndabere dị mkpa maka ịkwadebe ọgwụ mgbochi abụọ na itinye fluorescein, isotopes, enzymes na ọgwụ mgbochi ndị ọzọ akpọrọ.
 
 
Ngwaahịa ndị emetụtara:
Ngwa Cell Direct RT-qPCR

 

 


Oge nzipu: Sep-30-2021