1: Dochie ihe nnwale n'oge
Tọọ (NTC) njikwa adịghị mma ma kwugharịa ya ọtụtụ oge.Ozugbo achọpụtara na enwere mmetọ ngwaahịa PCR n'ime ụlọ nyocha, dochie ihe nnwale niile n'oge.Dị ka: regharịa na dozie primers, re-sterilize pipette n'ọnụ, EP tube, ddH2O, wdg, dochie na ọhụrụ pipette, na nwa oge gbaziri ndị ọzọ laboratories iji mee PCR nnwale.Ụlọ nyocha ahụ emetọọ ga-ekuku ma were ụzarị ultraviolet mee ya ruo mgbe ekpochapụ mmetọ ngwaahịa PCR tupu ịga n'ihu na nnwale ahụ.
2: Gbatịa oge ikpughe UV
Ọ dị mma ịmara na iji wepụ mmetọ DNA, radieshon ultraviolet mgbe niile kwesịrị ịgbatị awa 2 karịa ka ọ dị na mbụ.N'agbanyeghị nke ahụ, mmetụta nke UV irradiation na iwepụ obere iberibe (n'okpuru 200bp) nke nje DNA ka adịghị mma.
Ogologo ebili mmiri Ultraviolet (nm) bụ n'ozuzu 254/300nm, na o zuru ezu iji irradiate maka nkeji iri atọ.Ekwesiri iburu n'uche na mgbe ị na-ahọrọ UV iji kpochapụ mmetọ nke ngwaahịa PCR fọdụrụnụ, ekwesịrị ịtụle ogologo ngwaahịa PCR na nkesa nke ntọala n'usoro ngwaahịa.UV irradiation na-arụ ọrụ naanị maka obere iberibe n'elu 500 bp, ọ na-enwekwa mmetụta dị nta na obere iberibe.
N'oge irradiation UV, ntọala pyrimidine dị na ngwaahịa PCR ga-etolite dimers.Ndị dimers ndị a nwere ike ịkwụsị ndọtị ahụ, ma ọ bụghị pyrimidine niile dị na yinye DNA nwere ike ịmepụta dimers, UV irradiation nwekwara ike imebi dimers..Ogo nke nguzobe dimer na-adabere n'ogologo UV, ụdị pyrimidine dimer na usoro nke nucleotides dị n'akụkụ ebe dimer.Ya mere, ọ bụrụ na PCR amplified iberi dị ntakịrị, a na-atụ aro ka ị jiri usoro mmetọ ngwaahịa UNG mgbochi PCR.
3: Ndị na-emetọ mmetọ DNA a na-ejikarị eme ihe
A na-emepụta ikuku aerosols ngwa ngwa mgbe a na-agbakwunye pipettes, nke siri ike izere, ọ ga-edozi ngwa ngwa.Ya mere, ihe ịrụ ụka adịghị ya na ọ bụ nhọrọ dị mma iji ugboro ugboro na-eji ihe mkpofu mmetọ DNA pụrụ iche iji gbochie mgbasa nke mmetọ DNA.
4: Jiri UNG mgbochi mmetọ usoro
Mgbe ewepụrụ mmetọ ngwaahịa PCR, ụlọ nyocha nyocha nwere ike iji sistemu mmetọ ngwaahịa UNG mgbochi PCR iji gbochie mmetọ ngwaahịa PCR.N'ime ụlọ nyocha izugbe, ị nwere ike ịrụ akụkụ nnwale dị mfe, kewapụ mpaghara ngwaahịa PCR na mpaghara ndị ọzọ, guzobe ụfọdụ iwu na ụkpụrụ ụlọ nyocha, ma na-eduzi ọzụzụ dị mkpa iji gbochie omume mmetọ ngwaahịa PCR.
Ndụmọdụ: Ịmepụta ụlọ nyocha PCR nwere ezi uche, idowe ezigbo gburugburu PCR, ịmepụta usoro PCR ọkọlọtọ, na ịzụlite mmata ọrụ siri ike nke ndị nnwale bụ igodo iji gbochie ma ọ bụ ibelata mmetọ nke nnwale PCR.
Oge nzipu: Ọgọst-12-2021