Okwu mmalite:

RNA, aha sayensi ribonucleic acid, ndebiri ya sitere na RiboNucleic Acid, bụ ụdị acid nucleic nke e guzobere site na ijikọ ma ọ dịkarịa ala ọtụtụ ribonucleotides site na njikọ phosphodiester.

Ebumnuche nke inyocha RNA bụ iwepụ mkpokọta RNA na-enweghị mmetọ, na enwere ike ịchịkọta ụkpụrụ bụ isi nke mmịpụta RNA dị ka ndị a:

1. Buru ụzọ mebie mkpụrụ ndụ

2. Mgbe ahụ, wepụ macromolecular adịghị ọcha (protein, lipids, DNA, wdg).

3. N'ikpeazụ, RNA na-ebuli elu ka ọ na-ewepụ nnu na ihe mgbaze organic, ma na-eme ka RNA dị ọcha.

Oge gara aga na ugbu a nke usoro mmịpụta

Ọgbọ mbụ nke usoro mmịpụta RNA bụ usoro mmiri ozuzo TRIzol (reagents eji gụnyere guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, wdg) chepụtara site na nna nna aha ya bụ Piotr Chomczynski na nne nne Nicoletta Sacchi, n'ihi na nke a mepụtara na-enye ohere mmịpụta RNA ngwa ngwa na mfe, ebe ọ bụ na mgbe ahụ malitere RNA upsurge.

Ka e mesịrị, nna m ochie rere Invitrogen patent a, Invitrogen kwalitekwara usoro a n'ụwa ma ghọọ usoro a na-ejikarị eme ihe.

Mgbe e mesịrị, Thermo nwetara Invitrogen!

Ngwaahịa nọchiri anya: Invitrogen's TRIzol reagent

Agbanyeghị, usoro mmiri ozuzo TRIzol chọrọ otutu mmiri ozuzo na mmịpụta nke RNA, na reagents ejiri na-egbu egbu ma na-ewe ogologo oge iji rụọ ọrụ.

Ya mere, usoro nchacha nke kọlụm-enzyme nke ọgbọ nke abụọ bịara, na-eji akpụkpọ anụ silica gel dị ka ihe mgbakwunye nucleic acid iji mee ka mgbake nke RNA dị na nlele ahụ wee wepụ ihe ndị ọzọ adịghị ọcha.

Usoro ọgbọ nke abụọ na-eme ka ọrụ ahụ dị mfe na ndabere nke arụmọrụ kwụsiri ike, na-ebelata ihe ize ndụ, ma na-eme ka arụmọrụ nke mmịpụta RNA dịkwuo mma.

Ngwaahịa ndị nnọchi anya: QIAGEN RNeasy na ọtụtụ ngwaahịa ụlọ

Otú ọ dị, ma ụzọ ọgbọ nke mbụ na nke abụọ chọrọ iji DNAse wepụ mmetọ DNA, nke na-eweta ụfọdụ nsogbu na nyocha ndị na-esote ala.DNase fọdụrụnụ ga-ebelata arụmọrụ nke ntụgharị ntụgharị ma belata njikọ cDNA nke mbụ, si otú ahụ na-emetụta izi ezi nke nsonaazụ ya.

Ya mere, usoro mmịpụta ọgbọ nke atọ kachasị mma na ndabere nke ọgbọ nke abụọ.Nnwale ahụ adịghị mkpa ịgbakwunye enzymes ọ bụla, na RNA nwere ike ịnweta ngwa ngwa na naanị ogidi abụọ.

Kọlụm 1: Kọlụm na-ehicha DNA iji kpochapụ DNA

Kọlụm 2: Kọlụm naanị RNA na-ekesa ma nwetaghachi RNA

Ọrụ dị otú ahụ dị mfe ọ bụghị nanị na-azọpụta oge, kamakwa ọ na-eme ka ọrụ nke nyocha nke ala!

Ngwaahịa nọchiri anya: QIAGEN RNeasy Plus naMbidoNgwaahịa usoro nchacha RNA

(RNeasy Plus)

(Foregene'sNgwakọta mkpokọta RNA kewapụ ihe ọkụkụ)

Gwa gi nwayo!Ngwa RNA nke Foregene na-ewetakwa RNase Eraser dị mfe iji, nke nwere ike wepu 400μg RNase n'elu elu siri ike na nkeji 1, na-agbakwunyeghị ihe ọ bụla na-egbu egbu na ahụ mmadụ!

Foto1: eserese usoro ntụnyere ọrụ

Ngwaahịa Foregene nwere ike mezue mmịpụta RNA n'ime naanị egwu abụọ, emela ndị ọzọ ekworo maka ọganihu nnwale gị!

Foto2:Ensonaazụ nnwale ntụnyere chaatị

Ọgbọ nke mbụ (1: TRIzol)

Ọgbọ nke abụọ (2: RNeasy nke QIAGEN)

Ọgbọ nke atọ (3: QIAGEN's RNeasy gbakwunyere, 4: Foregene)

Foto3: eserese qPCR (esemokwu nkwuwa okwu)

Ọgbọ nke mbụ (akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ pụtara TRIzol -, uhie pụtara TRIzol +)

Ọgbọ nke abụọ (igwe anụnụ anụnụ pụtara QIAGEN RNeasy-, uhie pụtara QIAGEN RNeasy +)

Ọgbọ nke atọ (acha anụnụ anụnụ pụtara QIAGEN RNeasy gbakwunyere, akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ pụtara Foregene)

(Rịba ama: qPCR graph "-" na-egosi na etinyeghị DNA na DNA adịghị ewepụ ya. Ya mere, CT dị elu ma ihe na-esi na ya pụta ezighị ezi; "+" na-egosi na agbakwunyere DNA na DNA ewepụla, ihe na-esi na ya pụta bụ eziokwu)

Nkwalite teknụzụ ọ bụla pụtara na ọrụ nke nnwale ahụ na-etolite n'ụzọ dị mfe na nke ndị ọrụ enyi.

Foregene na-achọ inyere ọtụtụ ndị nyocha sayensị aka ịchekwa oge nnwale na ọnụ ahịa, nweta nsonaazụ nnwale dị elu, yana ijikọ ọnụ mepụta mmezu nyocha sayensị bara uru karịa.