Ị ka na-eji Trizol wepụ RNA?
Gosh, ekwela ka m chegbuo maka ahụike gị!
Trizol na-achọ ịbụ onye a ga-ekewapụ, agwala m na ị ka nọ n'ọchịchịrị?

Akụkụ bụ isi nke Trizol reagent bụ phenol, a na-agbakwunyekwa reagents organic dị ka chloroform na ọrụ nnwale ahụ.Ikpughe ogologo oge ga-emerụ ahụ ike gị, ọkachasị mmekọ anụ ahụ ozugbo nwere ike ime ka ọkụ kemịkal siri ike na ọnya na-adịgide adịgide.

N'ọnọdụ nkịtị, ndị mmekọ ụlọ nyocha nwere ike belata ihe egwu dị na ya site na ijikwa onwe ha nke ọma (yiri uwe lab, uwe aka na ihe mkpuchi).

Ndụmọdụ m na-enye gị bụ: biko dochie Trizol ozugbo iji zere mmerụ ahụ sitere na isi iyi.

1. Ngwaahịa ọgbọ mbụ nke mmịpụta RNA
pụta na 1987 (Trizol reagents)

uru:
Mwepụta zuru oke

Ihe ọghọm:
A na-achọ reagents na-egbu egbu dị ka guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform;
Ịrụ ọrụ dị egwu;
Kwesịrị iji DNAse wepụ mmetọ DNA

2.Ọgbọ nke abụọ nke mmepụta RNA
pụta na 1994 (QIAGEN RNeasy na ọtụtụ ngwaahịa ụlọ)

uru:
A na-anabata usoro centrifugal kọlụm, nke dị mfe ịrụ ọrụ;

Mwepu:
Mkpa centrifuge iji wepụ irighiri anụ ahụ
Kwesịrị iji DNAse wepụ mmetọ DNA

3.Ngwaahịa ọgbọ nke atọ nke mmịpụta RNA
Na-apụta na 2005 (QIAGEN RNeasy Plus na ForegeneNgwaahịa usoro nchacha RNA)

uru:
Jiri kọlụm wepụ DNA ozugbo wepụ DNA na irighiri anụ ahụ n'otu oge, chekwaa oge na mbọ;
Ọ dị mma ma dịkwa mma, ọ dịghị mkpa ịgbakwunye kọlụm nzacha na DNA iji wepụ adịghị ọcha ma zere mmetọ DNA

Ka anyị leba anya na ọrụ dị iche n'etiti ngwaahịa ọgbọ mbụ (Trizol), ngwaahịa ọgbọ nke abụọ (RNeasy) na ngwaahịa ọgbọ nke atọ (Foregene) nke mmịpụta RNA:

Ọrụ dị na ọnụ ọgụgụ ahụ doro anya: ngwaahịa ọgbọ nke atọ nwere uru doro anya

Naanị okwu atọ iji kọwaa: dị mfe!Ngwa ngwa!Nchekwa

Chaatị PK nke nsonaazụ nnwalemakaọgbọ mbụ, ọgbọ nke abụọ na ngwaahịa ọgbọ nke atọ nke mmịpụta RNA:

1. Electrophoretogram

Ọgbọ nke mbụ (1: Trizol)
Ọgbọ nke abụọ (2:QIAGEN RNeasy)
Ọgbọ nke atọ (3: QIAGEN RNeasy gbakwunyere, 4: Foregene)

Kedu ụdị ngwaahịa dị mma, ị ga-ama site na ntụnyere
RNA weputara site na iji ngwa Foregene
Ọ bụghị naanị na itinye uche dị elu kamakwa ezigbo iguzosi ike n'ezi ihe

Eserese 2.qPCR (esemokwu nkwubi okwu)

Ọgbọ mbụ (Trizol)

Ọgbọ nke abụọ (sky bluepụtaraQIAGEN RNeasy-, uhiepụtaraQIAGEN RNeasy +)

Ọgbọ nke atọ (acha anụnụ anụnụ pụtara Foregene, akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ pụtara QIAGEN RNeasy gbakwunyere)

(Rịba ama: Ọgbọ nke abụọ QIAGEN RNeasy nke qPCR graph pụtara na ngwa ahụ anaghị agbakwunye DNA ma ọ dịghị ewepụ nje DNA. Ya mere, CT dị elu ma ihe na-esi na ya ezighị ezi; QIAGEN RNeasy + pụtara na agbakwunyere DNA na ewepụwo mmetọ DNA, na nsonaazụ ziri ezi)

Ma ọ bụ electrophoretogram ma ọ bụ ọnụ ọgụgụ PCR amplification curve graph, ogo ngwaahịa Foregene adịghị ala karịa ngwaahịa ndị mba ọzọ ebubata.