PCR Direct bụ mmeghachi omume na-eji anụ ahụ ma ọ bụ ihe ọkụkụ eme ihe ozugbo na-enweghị mmịpụta acid nucleic.N'ọtụtụ ụzọ, PCR kpọmkwem na-arụ ọrụ dị ka PCR oge niile

Isi ihe dị iche bụ ihe nchekwa omenala ejiri na PCR ozugbo, enwere ike idobe ihe nlele ahụ ozugbo na mmeghachi omume PCR na-enweghị mmịpụta acid nucleic, mana enwere ihe achọrọ maka nnabata nke enzymes yana ndakọrịta nke ihe nchekwa na-etinye aka na mmeghachi omume PCR ozugbo.

Ọ bụ ezie na enwere ihe mgbochi PCR ma ọ bụ karịa na nlele nkịtị, PCR kpọmkwem ka nwere ike nweta nkwalite a pụrụ ịdabere na ya n'okpuru ọrụ nke enzymes na buffers.Mmeghachi omume PCR ọdịnala chọrọ nucleic acid dị elu dị ka ndebiri, nke nwere ike igbochi ezigbo ọganihu nke mmeghachi omume PCR ma ọ bụrụ na ndebiri nwere protein na adịghị ọcha ndị ọzọ.PCR Direct bụ ugbu a otu n'ime teknụzụ ama ama na ngalaba nyocha nke mkpụrụ ndụ ihe nketa.

01 Direct PCR bụ nke izizi maka anụmanụ na osisi

Ngwa mbụ nke PCR kpọmkwem bụ n'ọhịa nke anụmanụ na osisi, dị ka ọbara, anụ ahụ na ntutu nke oke, pusi, ọkụkọ, oke bekee, atụrụ, ehi, wdg, osisi epupụta na mkpụrụ, wdg, na-eji na-amụ genotyping, transgenic, plasmid nchọpụta, Gene knockout analysis, DNA isi njirimara, ụdị njirimara, SNP analysis na ndị ọzọ ubi.

Ubi ndị a nwere ụfọdụ njirimara ndị a na-ahụkarị, ya bụ, ọdịnaya mkpụrụ ndụ ihe e lekwasịrị anya dị oke elu na mmịpụta nucleic acid na-enye nsogbu, yabụ PCR ozugbo nwere ike ọ bụghị naanị ịchekwa oge ma nwee obere mmetụta na nsonaazụ ya, mana ọ na-echekwa ọnụ ahịa.

Direct PCR eji maka nchọpụta pathogen bụ okwu nke afọ ndị na-adịbeghị anya, ụfọdụ ndị na-emepụta PCR reagent emeela ọtụtụ mgbalị na ntụziaka a mgbe ha na-emepụta ihe ọhụrụ.Karịsịa na ọrịa COVID-19 a, ọtụtụ ngwaahịa nchọpụta dị otú ahụ apụtala n'ahịa, dị ka SARS-CoV-2 Nucleic Acid Detection Kit (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method) nke Foregene mere nyocha ma mepụta ya, nke na-eji teknụzụ RT PCR Real-time (rRT-PCR) maka nchọpụta qualitative nke SARS-CoV-2 n'ime mmadụ nassopharyng acid nucleic acids.

Foregene bụ otu n'ime ụlọ ọrụ na-eji teknụzụ PCR Direct, maka nchọpụta ORF1ab, N, E, na nkịtị.iche iche lineages nucleic acids na mmadụ nasopharyngeal ma ọ bụ oropharyngeal swab sample dị ka SARS-CoV-2 B.1.1.7 lineage (UK), B.1.351 lineage (ZA), B.1.617 lineage (IND) na P.1 lineage (BR).

02  Reagents chọrọ maka PCR ozugbo

Ihe atụ Lysate

Enwere ike ịhazi lysate sample n'onwe gị ma ọ bụ zụta ya.Ihe dị iche na nhazi nke ụdị lysate dị iche iche ga-eme ka ikike ịgha ụgha dị iche iche, mgbe ahụ, oge ịgha ụgha ga-adịtụ iche.Dị ka ihe atụ, maka nkwadebe nke anụ ahụ anụ ahụ samples, 30 nkeji ma ọ bụ n'abalị lysis na-atụ aro n'ozuzu, na lysis ngwọta nke nje sitere na 3-10 nkeji.

Ngwakọta nke PCR Master mix

A na-atụ aro ka iji DNA polymerase mmalite na-ekpo ọkụ na-eme ka mmụba dị iche iche dịkwuo elu ma na-abawanye ike nkwalite.Isi PCR kpọmkwem bụ polymerase na-anabata ya nke ukwuu.

Wepu ma ọ bụ gbochie ihe ndị dị na nlele ahụ na-emetụta mmụba DNA

Mgbe emechara ihe nlele ahụ na lysate, a ga-ahapụ protein, lipids na irighiri ihe ndị ọzọ, ihe ndị a ga-egbochi mmeghachi omume PCR.Ya mere, PCR kpọmkwem chọrọ mgbakwunye nke mwepụ ma ọ bụ ihe mgbochi kwekọrọ iji belata mmetụta nke ihe ndị a.

03  Nchịkọta isi ihe ọmụma ise nke PCR kpọmkwem

Nke mbu, Teknụzụ PCR Direct bụ teknụzụ PCR ozugbo maka ụdị ụdị ndu dị iche iche.N'okpuru ọnọdụ teknụzụ a, ọ dịghị mkpa ikewapụ na wepụ acid nucleic, jiri ihe nlele anụ ahụ ozugbo dị ka ihe ahụ, ma gbakwunye ihe ndị na-eme ka mkpụrụ ndụ ihe nketa ga-eme mmeghachi omume PCR.

Nke abụọ, Teknụzụ PCR Direct abụghị naanị teknụzụ nkwalite ndebiri DNA ọdịnala, mana gụnyekwara ndebiri RNA ntụgharị PCR.

Nke atọ, Teknụzụ PCR Direct ọ bụghị naanị na-eme mmeghachi omume PCR dị mma na nlele anụ ahụ, kamakwa gụnyekwara mmeghachi omume qPCR Real-Time, nke chọrọ usoro mmeghachi omume ka ọ nwee ikike mgbochi mgbochi azụ azụ na-ebelata ike na-emegide ya.

Nke anọ, ihe nlele nke teknụzụ Direct PCR lekwasịrị anya chọrọ naanị ntọhapụ nke ndebiri acid nucleic, na anaghị ewepụ protein, polysaccharides, ion nnu, wdg na-egbochi mmeghachi omume PCR.Nke na-achọ nucleic acid polymerase na PCR Mix na usoro mmeghachi omume iji nweta ezigbo nguzogide na ngbanwe iji hụ na ọrụ enzyme na ngbanwe ziri ezi n'okpuru ọnọdụ mgbagwoju anya.

Nke ise, ihe nlere anụ ahụ ezubere iche site na teknụzụ Direct PCR na-enweghị ọgwụgwọ nucleic acid ọ bụla na ọnụọgụ nke ndebiri dị obere, nke chọrọ usoro mmeghachi omume ka ọ nwee mmetụta dị elu na arụmọrụ nkwalite.