• facebook
  • njikọ
  • youtube

Akụkụ pụtara ìhè nke mmeghachi omume PCR bụ nnukwu ikike nkwalite ya yana oke mmetụta dị oke elu.Iji meziwanye arụmọrụ PCR na nchọpụta nchọpụta, anyị na-agba mbọ imeziwanye ikike nkwalite PCR na nchọpụta nchọpụta, mana isi ọwụwa dị na usoro nke nnwale ahụ.Ihe nrịbama ụgha na-emekarị, na ntakịrị ihe nlele nke mmetọ obe ma ọ bụ mmetọ ngwaahịa PCR nwere ike ime ka ọ dị mma na nnwale ahụ.

Ụdị mmetọ ngwaahịa PCR ise

Enwere ọtụtụ ihe kpatara mmetọ PCR, nke enwere ike kewaa n'ime ụdị ndị a:

1. Ofefe mmetọ n'etiti ụdị

1.1

A na-ebute mmerụ ahụ nke ọma site na mmetọ nke akpa maka ịnakọta ihe nlele ahụ, ma ọ bụ mgbe a na-etinye ihe nlele ahụ, a na-esi na ya pụta n'ime akpa ahụ n'ihi nkwụsị nke na-adịghị mma, ma ọ bụ na-arapara n'ahụ ahụ n'èzí nke akpa ahụ, nke na-ebute mmetọ cross;Mmetọ na-eduga na mmetọ n'etiti ụdị;ụfọdụ ụdị ụmụ nje, ọkachasị nje, nwere ike gbasaa site na ikuku ikuku ma ọ bụ mepụta ikuku, na-ebute mmetọ ibe ha.

2. PCR reagent mmetọ

Isi ihe kpatara ya bụ na n'oge nkwadebe nke PCR reagents, egbe sample, akpa, mmiri distilled okpukpu abụọ na ngwọta ndị ọzọ na-emerụ site na PCR nucleic acid template.

1.2

3.Cloning mmetọ plasmid

1.3

N'ime ụlọ nyocha ihe ọmụmụ ihe omimi na ụfọdụ ụlọ nyocha na-eji plasmids cloned dị ka njikwa dị mma, nsogbu nke mmetọ plasmid cloned bụkwa ihe a na-ahụkarị.N'ihi na ọdịnaya nke cloning plasmid na unit olu bụ nnọọ elu, na ndị ọzọ ngwá ọrụ na reagents na-mkpa na-ọcha usoro, na plasmid na ndụ mkpụrụ ndụ yiri nnọọ ka a ga-emerụ n'ihi na ike ibu na mmeputakwa ikike nke ndụ sel.

4.Mmetọ nke ngwaahịa agbagoro

Mmetọ nke ngwaahịa agbakwunyere bụ nsogbu mmetọ a na-ahụkarị na mmeghachi omume PCR.N'ihi na nnomi nke ngwaahịa PCR buru ibu (n'ozuzu 1013 nnomi/ml), nke dị elu karịa njedebe nke nọmba nchọpụta PCR, ntakịrị ihe mmetọ ngwaahịa PCR nwere ike ime ka ọ dị mma.

1.4

5.Aerosol mmetọ

1.5

Mmetọ Aerosol bụ ụdị mmetọ nke ngwaahịa PCR kachasị, ọ bụkwa nke kachasị mfe a ga-eleghara anya.A na-emepụta ya site na esemokwu dị n'etiti mmiri mmiri na ikuku.N'ozuzu, enwere ike ịmepụta mmetọ aerosol mgbe emeghere mkpuchi, mgbe a na-achọ ihe nlele ahụ, ma ọ bụ ọbụna mgbe a na-ama jijiji nke ọma tube mmeghachi omume.Dị ka mgbako si kwuo, urughuru aerosol nwere ike ịnwe 48,000, ya mere mmetọ kpatara ya bụ nsogbu kwesịrị nlebara anya pụrụ iche.

Karịsịa, ụlọ nyocha nyocha na-ejikarị otu ụzọ mbụ iji nwalee otu mkpụrụ ndụ ihe nketa.Ka oge na-aga, oke mmetọ ngwaahịa PCR ga-eme na oghere ụlọ nyocha.Ozugbo mmetọ dị otú ahụ mere, ọ na-esiri ike iwepụ ya n'oge dị mkpirikpi.

Maka ụdị mmetọ atọ mbụ, anyị nwere ike iji ụzọ dị irè iji zere, mana mmetọ nke ngwaahịa PCR kpatara siri ike igbochi, ọkachasị n'ịrụ ụlọ nyocha PCR na-abụghị ọkọlọtọ.N'ime usoro PCR, mgbe ọnụ ọnụ pipette na-aṅụ ma na-afụ mmiri mmiri ahụ, ma meghere mkpuchi tube PCR, a ga-emepụta ikuku aerosol.Mkpụrụ ndụ DNA nke aerosol na-ebu (otu aerosol nwere ike iburu ọtụtụ iri puku DNA) na-esiri ike ikpochapụ n'ihi na ha na-ese n'elu ikuku.Ozugbo ewebatara ule PCR na-esote, ihe nhụsianya ụgha ga-apụtarịrị.

Dị ka egosiri na foto dị n'okpuru, njikwa na-adịghị mma mekwara ka band nke mmasị dabara adaba:

1.6

Ewebata akụkụ mbụ nke mbipụta a nke mmetọ na mgbochi PCR ebe a.Okwu na-esote ga-ewetara gị akụkụ nke abụọ "Mgbochi nke mmetọ ngwaahịa PCR", yabụ nọrọ na nche!


Oge nzipu: Jul-25-2017